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Caracterización y expresión de transferrina y ferritina del pargo amarillo (Lutjanus argentiventris) expuestos a hierro y a la infección con Aeromonas hydrophila
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FELIPE DE JESUS ASCENCIO VALLE - Director
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
Pargo amarillo; Lutjanus argentiventris; hierro; transferrina; ferritina; expresión génica; Aeromonas hydrophila
El hierro es un elemento esencial que es requerido para el crecimiento y supervivencia de la mayoría de los organismos. Sin embargo, en cantidades excesivas el hierro puede ser tóxico. Para mantener la homeostasis de este elemento, los organismos cuentan con un mecanismo de regulación que es llevado a cabo mediante la interacción de varios genes, entre ellos los codificantes para las proteínas ferritina y transferrina. El pargo amarillo (Lutjanus argentiventris) es considerado un candidato potencial de cultivo, sin embargo, está expuesto a infecciones bacterianas que compiten por el hierro disponible; y en general, existe poca información acerca de la respuesta inmune a nivel transcripcional en esta especie. El objetivo de esta tesis fue caracterizar y cuantificar los niveles de expresión de ferritina y transferrina en peces expuestos a una sobrecarga o deficiencia de hierro y retados con Aeromonas hydrophila. En este estudio se obtuvo la secuencia completa de ADNc de transferrina y ferritina M con una longitud de 2,482 y 1,076pb, y con un ORF de 2,073 y 531pb, respectivamente; y una secuencia deducida de aminoácidos de 690 residuos para transferrina y 176 residuos para ferritina M. Los resultados de expresión génica mostraron diferentes patrones de expresión dependiente de tejido. Se observó una disminución en la expresión de transferrina en hígado, intestino y piel de peces infectados tanto en condiciones con sobrecarga de hierro como con quelante. Los niveles de expresión de ferritina M y H aumentaron significativamente en branquia después de la infección en las dos condiciones de disponibilidad de hierro. Esto sugiere que ferritina y transferrina juegan una función importante durante una infección bacteriana en pargo amarillo.
Iron is an essential element required for growth and survival of most organisms. However, iron is toxic when present in excess. Organisms have an adjustment mechanism for maintaining iron homeostasis, which is carried out through the interaction of several genes, including those coding for the proteins ferritin and transferrin. Yellow snapper (Lutjanus argentiventris) is considered a potential candidate aquaculture species, however; little is known about the immune response of yellow snapper at the transcriptional level. Therefore, the purpose of this study was to clone the full-length cDNA sequence of transferrin and ferritin M and quantify the expression levels of these genes in yellow snapper exposed to iron overload or deficiency and infection with the bacterial pathogen Aeromonas hydrophila. The complete cDNA sequences of transferrin and ferritin M were obtained using RACE technique. The full-length cDNA was 2,482 and 1,076 bp respectively, showing an ORF of 2,073 and 531 bp; and deduced amino acid sequence of 690 residues for transferrin and 176 residues for ferritin M. Moreover, the expression levels were measured by real-time PCR (RT-qPCR) using the EF-1α gene as an endogenous control. Results showed different patterns of tissue-specific expression. Expression of transferrin in liver, intestine and skin was lower in infected fish in both iron and chelating conditions compared to uninfected controls. Expression levels of ferritin M and H increased significantly in gill after infection in both iron treatments. This suggests that ferritin and transferrin play an important role during pathogenic infection in yellow snapper.
Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.
05-11-2015
Tesis de maestría
Español
FISIOLOGÍA ANIMAL
Aparece en las colecciones: Tesis de Maestría en Ciencias en Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturales
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